Příprava agarózového gelu pro elektroforézu

Příprava agarózového gelu pro elektroforézu

Poznámka: Vždy používejte jednorázové rukavice!

Pokyny krok za krokem

Vážení agarózového prášku:use vážicí papír a elektronické váhy pro odměření 0,3 g agarózového prášku (na základě 30ml systému).

Příprava vyrovnávací paměti TBST:popravte 30 ml 1x TBST pufru ve 100 ml Erlenmeyerově baňce.

Rozpouštění agarózového prášku:pagarózový prášek do TBST pufru a dobře protřepejte.Vložte je dovnitřdo mikrovlnné trouby a zahřívejte (obvykle 50 sekund, zakryté hliníkovou fólií), dokud se úplně nerozpustí.

Chlazení a přidání nukleázy:uv rukavicích vyjměte směs z mikrovlnné trouby a nechte ji mírně vychladnout ve studené vodě, dokud se neohřeje (přibližně 60 °C). Za stálého třepání přidejte 2 µl nukleázy (náhrada Eb), aby se důkladně promíchalo.

Příprava gelové formy:

• Copřít a vysušitzásobník na gel a zařízení na odlévání geluelektroforetického zásobníku.
•  Pzašněrovat gelzásobníkdo vnitřní nádrže a zasuňte hřeben do pevné polohy.
• Roztok agarózového gelu vychlazený na asi 65 °C promíchejte a opatrně nalijte nagelový zásobníkvzařízení na odlévání gelu, pomalu roztírejte, dokud se na skleněné desce nevytvoří rovnoměrná gelová vrstva.
• Nechte uležet při pokojové teplotě, dokud gel úplně neztuhne.
• Jemně sejměte hřeben svisle a odstraňte pásku.
• Umístěte gelzásobníkdo elektroforetické nádoby.

Důležité: Ujistěte se, že v oblasti hřebenových zubů nejsou žádné vzduchové bubliny. Povrch kapaliny by měl být hladký bez zvlnění.

Spuštění gelu

Načítání gelu

Poté, co gel ztuhne, vložte jej do elektroforetické nádoby a nalévejte elektroforetický pufr, dokud není gel ponořen.

Příprava vzorků

• Vyjměte značku a nakládací pufr z chladničky.
• Ke vzorkům přidejte 6 µl nanášecího pufru a dobře promíchejte.
• Pomocí mikropipety pomalu vkládejte vzorky do velkých jamek gelu (dávejte pozor, abyste gel nepropíchli a nedávkovali celý objem, aby nevznikly vzduchové bubliny).
• Vložte marker do kterékoli z malých jamek (zapamatujte si jeho polohu).

Spuštění elektroforézy

• Nádrž pro elektroforézu zakryjte a ihned po nanesení gelu spusťte elektroforézu.
• Nastavte napětí na 60-100V. Vzorky budou migrovat ze záporné elektrody (černá) na kladnou elektrodu (červená).
• Vyšší napětí zkracuje efektivní separační rozsah agarózového gelu.
• Zastavte elektroforézu, když bromfenolová modř dosáhne asi 1 cm od spodního okraje gelové destičky.

Pozorování výsledků

Po oddělení pásů zastavte elektroforézu, vyjměte gel a přímo jej detekujte a fotografujte.

K fotografování a pozorování pruhů použijte gelový zobrazovací systém (zkontrolujte, zda existují pruhy pro marker nebo vzorky).

Po získání mapy gelového pásku najděte značku. Na základě značky můžete určit cílová pásma!

Společnost Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) vyrábí produkty elektroforézy již více než 50 let. Představujeme zde naše systémy horizontální elektroforézyagarózový gelelektroforéza.Vybratsystémy horizontální elektroforézyz Pekingu liuyi za váš experiment gelové elektroforézy, který pomůže vašemu výzkumu v biotechnologickém průmyslu.

Nabízíme různé modely horizontálních elektroforézních nádrží pro odlévání a provoz malých rozměrůagarózagely na velkéagarózagely

Průvodce výběrem pro horizontální ponořenou gelovou elektroforézu

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) se specializuje na výrobu elektroforézních přístrojů již více než 50 let s naším vlastním profesionálním technickým týmem a R&D centrem. Máme spolehlivou a kompletní výrobní linku od návrhu po kontrolu a sklad, stejně jako marketingovou podporu. Mezi naše hlavní produkty patří elektroforézní cela (nádrž/komora), napájecí zdroj pro elektroforézu, modrý LED transiluminátor, UV transiluminátor, gelový obrazový a analytický systém atd. Dodáváme také laboratorní přístroje, jako je PCR přístroj, vortex mixer a centrifuga pro laboratoř.

Pokud máte nějaký plán nákupu pro naše produkty, neváhejte nás kontaktovat. Můžete nám poslat zprávu na email[e-mail chráněný]nebo[e-mail chráněný]nebo nám zavolejte na číslo +86 15810650221 nebo přidejte Whatsapp +86 15810650221 nebo Wechat: 15810650221.

Naskenujte prosím QR kód pro přidání na Whatsapp nebo WeChat.